Süper Hızlı Sıvı KromatometrProminenece UFLC

Hızlı analiz uzun zamandır önemli bir teknik konu olarak kullanılmıştır, ancak LCMS'nin hızlı bir şekilde popülerliği ile birlikte, maliyet-verim oranının artması acil bir sorun haline geldi ve hızlanmanın artmasında önemli bir faktör haline geldi.
Hızlı analiz, genellikle kromatografik sütunları kısaltarak veya akış fazındaki akışı artırarak analiz süresini kısaltır. Bununla birlikte, yaygın olarak kullanılan 5 μm parçacık boyutundaki bir dolum sütunu kullanarak, herhangi bir yöntem kullanarak ayırma performansı önemli ölçüde azalır ve böylece hızlanmayı anlamsız hale getirir.
Bu nedenle aşağıdaki iki yöntem geliştirildi:
• Küçük parçacık boyutlarındaki doldurma
Bu yöntem hızlı ayrılmayı mümkün kılar. Bununla birlikte, kromatografik sütunlardaki akış direncinin artması nedeniyle, aletin çeşitli parçaları ve kromatografik sütunlar tarafından karşılanan basınç da önemli ölçüde artacaktır.
• Yüksek sıcaklık ayrımı
Yüksek sıcaklıklar, maddenin yayılmasını hızlandırabilir, aynı zamanda kromatografik sütunlardaki akış direncini azaltabilir ve hızlı ayrılmayı mümkün kılar. Yüksek sıcaklık analizi sütun basıncını azaltmakta etkilidir, ancak yüksek sıcaklıklar kromatografik sütunun bozulmasına neden olur ve örneklerin parçalanmasına neden olur.
Geri basınç sorununu çözmek için, basınç kapasitesini iyileştiren özel aletler geliştirildi ve bu tür aletler genellikle daha pahalıdır. Bununla birlikte, bu özel aletler örnek alma performansı ve hassasiyeti açısından uzlaşmak zorunda kaldı. Ayrıca, çok ince bir dolum sütunu, donanım için yüksek talepler, bu kromatografik sütunu kullanarak geliştirilen analiz yöntemi kullanışlılığı feda eder. Bu nedenle, bu alet geleneksel HPLC analizlerinde kullanılırsa, verimliliği düşecektir.
Prominence hızlı ayrılmayı destekler
Prominence, araştırmacıların geleneksel ve yüksek hızlı analiz ihtiyaçlarını karşılayan standart parçaları kullanarak, daha düşük basınçta hızlı analiz yapmak için 85 ° C'ye kadar çalışma sıcaklıklarını destekleyebilir, aynı zamanda alet daha pahalı alet yapılandırmalarında bile daha az görülen analitik performans ve akış seviyelerini yansıtır.
Prominence UFLC, aşağıdaki özelliklerle hızlı analizleri destekler:
• Küçük sütun boruları ve küçük hacimli dolaşım havuzları sütun dışı tepe genişleme etkisini azaltır.
• 2.2 μm parçacık boyutunda Shim-pack XR-ODS kromatografik sütunu kullanın.
Shim-pack XR-ODS, ayrım verimliliği ve basınç arasındaki ilişkiden akıllıca denge bulmak ve ayrım etkisini arttırmak veya sürdürmek için analiz süresini kısaltarak yeni nesil hızlı analiz kromatografik sütunlarıdır.

Chromatographic conditions; column: described above, mobile phase: water/acetonitrile (3/7,v/v), flow rate: described above, temperature: 40 ℃, detection: absorbance at 245 nm, sample volume: 4μL(XR-ODS), 10μL(VP-ODS).
Peaks; 1: actophenone, 2: propiophenone, 3: butyrophenone, 4: balenophenone, 5: hexanophenone, 6: heptanophenone, 7: octanophenone.
• Prominence SIL-20A otomatik örnekleyicisi, 10 saniyede 10 μl'lik süper hızlı örnekleme sağlar.

Chromatographic conditions; column: Shim-pack XR-ODS(3mm i.d.×30 mm, 2.2μm), mobile phase: water/acetonitrile(4/6 to 2/8 in 0.4 min, convex gradient), flow rate: 3mL/min, temperature: 80 ℃, detection: absorbance at 245 nm, sample volume: 4μL(each 800 nm ol),.0.1 min delayed injection.
Peaks; 1: actophenone, 2: propiophenone, 3: butyrophenone, 4: balenophenone, 5: hexanophenone, 6: heptanophenone, 7: octanophenone.
• 85 ° C'ye kadar yüksek sıcaklık analizini destekler.
Sıcaklık ve Hızlı Analiz: Sütun sıcaklığı arttıkça, teorik kule levhaları sayısı arttı, sütun etkisi arttı ve sütun basıncı düştü.

Chromatographic conditions;
mobile phase:　water/acetonitrile (3/7, v/v),
detection: absorbance at 245 nm.
Zirveler: 1: Fenilen 2: Fenilen 3: Fenilen 4: Fenilen 5: Fenilen 6: Fenilen 7: Fenilen
Sıcaklığın bileşik üzerindeki etkisi: Yüksek sıcaklık analizi sütun basıncını azaltmakta etkilidir, ancak yüksek sıcaklıklar kromatografik sütunun bozulmasına neden olur ve örneklerin parçalanmasına neden olur. Yüksek sıcaklık analizi sadece hızlı analiz için yardımcı bir araç olarak kullanılır.
• Yüksek örnekleme frekansına sahip detektörler, bilgi kaybetmeden hızlı veri elde etmeyi sağlar.
• Genel kromatografik koşulları UFLC koşullarına dönüştürmek için özel kromatografik yöntem dönüştürme yazılımı, analiz yöntemlerinin çeşitliliğini sağlar.

Hızlı analiz tekrarlanabilirliği
Hızlı ayrılımda bileşen saklama süresinin tekrarlanması, geleneksel analizlerden daha zor. Saklama Zamanı Tekrarlanabilirliği (RSD) ve Zamanın Kare Kökü Ters oranı artmaktadır, bu nedenle geleneksel analizlerden daha sıkı sıvı verme performansı gerektirir. Prominence UFLC, 3 nL/dakika mikro darbe çözünürlüğünde, 0,1 saniyede kontrol edilen gradiyent sıvı sıvısı sıvısı sıvısı sıvısı sıvısı sıvısı sıvısı sıvısı sıvısı sıvısı sıvısı sıvısı sıvısı sıvısı sıvısı sıvısı sıvısı sıvısı sıvısı

Yüksek Akış Nedir?
Hızlı sıvı kromatografinin hedefi yüksek akım, yani günde veya saatte daha fazla örnek analiz edilir. Yüksek akım sağlamak için sadece tek bir örnek analizi süresini kısaltmamakla kalmaz, aynı zamanda tüm döngü örnekleme ve analiz süresini de optimize etmek gerekir. Hızlandırmanın amacı sadece analiz süresini değil, aynı zamanda analiz döngüsünü de kısaltmaktır. Prominence UFLC'nin örnek enjeksiyonu hızı 10 saniyedir ve analiz döngüsünü büyük ölçüde kısaltır.

Uygulama Örnekleri

PTC türevli amino asitlerin UFLC analizi

Amino asit analizi iki test yöntemi vardır, biri iyon değişimi kromatografik sütunu kullanarak ayrıldıktan sonra, sütun sonrası türevleme yöntemi ve diğeri, ilk türevlemeden sonra, ters fazlı kromatografik sütunu kullanarak ayrılmak için sütun öncesi türevleme yöntemidir. Hızlı bir analiz açısından göz önüne alındığında, sütun öncesi türevleme yöntemi etkilidir. Burada, Shim-pack XR-0DS ile daha kısa bir süre için amino asit analizi yapıldı.
Türevleme için fenil isosianat kullanılır. Sütun sonrası türevleme 1 saat sürer ve sütun öncesi türevleme düzenli kromatografik sütunları kullandığında 25 dakikalık bir analiz 4 dakikaya kadar kısaltılabilir.

Pigmentlerin UFLC analizi

Gıdalara eklenen renkler, yüksek su çözünürlüğünde ve çoğunlukla HPLC ile analiz edilen sentetik ve doğal bileşiklerdir. Ancak birden fazla renk kombinasyonu yapıldığında, aynı anda analiz uzun süre alır. Burada Shim-pack XR-ODS Süper Hızlı LC ile yapılan aynı zamanda pigment analizi örneği gösterilir. 12 bileşen pigmentin aynı anda analiz edildiği sonuçlar aşağıdaki kromatografik gibi görünüyor. Geleneksel LC kullanarak analiz süresi 50 dakikadır, süper hızlı LC kullanarak ise yaklaşık 6 dakikadır.

Polisiklik aromatik hidrokarbonların (PAH) UFLC analizi

PAHs, araç gibi egzoz gazlarının atmosfer kirliliğini belirleyen bir kimyasaldır. PAH'ler çok kanserojenidir, bu nedenle bu maddelerin atmosferik izlenmesi önemli bir ölçümdür. PAH'ler güçlü bir floresans gösterir ve yüksek hassasiyetli analizler için floresan detektörler kullanılabilir.
Bu 10 PAH'nin analizi için, kayıpsız ayrılma durumunda, UFLC, geleneksel LC'ye kıyasla (analiz süresi 50 dakika) 10 kat daha hızlı bir analiz (analiz süresi 5 dakika) gerçekleştirdi.